细胞及CD4+CD25+Treg细胞表达的影响

　　作者：李慧敏,李惠新　　作者单位：730030甘肃兰州大学第二临床医学院妇产科

　　【摘要】 目的：探讨主动免疫治疗对原因不明复发性流产(URSA)患者外周血CD56+CD16+NK细胞及CD4+CD25+Treg细胞表达的影响。方法：应用流式细胞仪检测50例URSA患者经主动免疫治疗前后外周血CD56+CD16+NK细胞及CD4+CD25+Treg细胞，并与正常育龄妇女作对照。结果：与对照组比较，URSA组CD56+CD16+NK细胞比例上升而CD4+CD25+Treg的表达下降(P<0.05)。经淋巴细胞主动免疫治疗的患者，治疗后CD56+CD16+NK细胞数量较治疗前降低(P<0.05);CD4+CD25+Treg的表达较治疗前增高(P<0.05)，差异有统计学意义。结论：URSA的发生与CD4+CD25+Treg的表达下降及具有杀伤活性的CD56+CD16+NK细胞数量上升有关，主动免疫治疗可以降低CD56+CD16+NK细胞数量，上调CD4+CD25+Treg的表达，从而有利于胚胎发育。

　　【关键词】 复发性流产 淋巴细胞 免疫治疗 自然杀伤细胞

　　资料与方法

　　2008年10月～2009年8月原因不明复发性流产(URSA)患者50例作为治疗组，年龄22～44岁，平均29.67±4.1岁。正常对照组：同期正常非妊娠妇女27例，年龄23～39岁，平均28.91±2.02岁。

　　方法：主动免疫治疗方法。抽取健康配偶或第三者外周血50ml，分离淋巴细胞，用生理盐水充分洗涤3次，调至细胞浓度(2～7)×107/ml,分别在患者前臂注射3～5mm的皮丘各3个。每4周1次，3次为1个疗程。

　　统计学处理：组间的比较用q检验。

　　结 果

　　URSA组治疗前CD56+CD16+NK细胞表达为(22.68±6.21)%，较正常对照组(13.24±3.51)%高，差异有统计学意义(q=2.96，P<0.05)。URSA组治疗后CD56+CD16+NK细胞表达为(15.07±4.54)%，较治疗前下降，差异有统计学意义(q=3.45，P<0.05);治疗后CD4+CD25+Treg细胞表达为(11.40±5.57)%，较治疗前上升，差异有统计学意义(q=2.77，P<0.01)。

　　讨 论

　　复发性流产是指连续≥2次自然流产，发生率1%～5%[1]。除已知的遗传、解剖、感染、内分泌等原因外，仍有50%～70%原因不明，称为原因不明复发性流产(URSA)，其中50%～60%与免疫有关[2]。多项研究表明，复发性流产患者由于NK细胞毒性明显增高，而调节T细胞(CD4+CD25+Treg)表达下降，导致对胚胎的免疫杀伤，从而引起流产。

　　NK细胞为非特异性免疫活性细胞，其细胞表面标志为CD56分子。NK细胞的杀伤活性无MHC限制，通过其直接与靶细胞接触后释放穿孔素、颗粒酶等细胞因子，诱导靶细胞程序性死亡。NK细胞分两类，一类为CD56+CD16-(90%)另一类为CD56+CD16+(10%)。CD56+CD16-NK细胞有免疫抑制作用和免疫营养作用。可经IL-2刺激转化为CD56+CD16+NK细胞，细胞毒性增强，发挥免疫防御功能[3]。研究证实CD4+CD25+T细胞在妊娠期参与抑制母体对同种异体移植物胎儿的免疫反应，从而保证妊娠的成功。

　　本研究表明：复发性流产患者接受主动免疫治疗后CD4+CD25+Treg的比例明显上调，CD56+CD16+NK细胞的表达下降。由此推测应用淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产的患者可能是通过外来抗原激活母体调节性T细胞，以及通过NK细胞功能状态调节的来诱导母体对胚胎的免疫耐受，保护胚胎免受母体的排斥，从而妊娠得以成功。而且检测CD4+CD25+Treg细胞、CD56+CD16+NK细胞可作为免疫治疗疗效观察的有效指标。

　　【参考文献】

　　1 Stephenson MD.Frequency of factors associated with habitual abortion in 197 couples.Fertil Steril,1996,66:24-29.

　　2 林其德.免疫所致复发性流产和习惯性流产.中华妇产科杂志,2000,35(12):760.

　　3 Matsubayashi H,Shida M,Kondo A,et al.Preconception peripheral natural killer cell activity as a predictor of pregnancy outcome in patients with unexplained infertility.Am J Reprod Immunol,2005,53(3):126-131.